多头带绦虫TPx基因片段的克隆及原核表达

作者：李永光; 李文卉; 李航; 盖文燕; 王鸿盛; 姚菊霞; 王艳华; 张德林; 贾万忠; RaduBlaga; 付宝权

来源：中国兽医科学, 2009, (03): 251-256.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2009.03.011

• 多头带绦虫
• 多头蚴
• 硫氧还蛋白过氧化物酶
• 重组蛋白
• 免疫原性 Taenia multiceps
• coenurus
• thioredoxin peroxidase
• recombinant protein
• immunogenicity

从自然感染的病羊脑内采集多头蚴原头节,提取总RNA,采用RT-PCR技术扩增多头带绦虫硫氧还蛋白过氧化物酶(TmTPx)基因片段,PCR产物连接到pMD18-T载体,转化至大肠杆菌DH5α后测序,发现克隆到的TmTPx基因片段开放阅读框为453 bp,编码150个氨基酸。对TmTPx基因片段进行限制性酶切后连接到表达载体pGEX-4T-1,构建重组表达质粒pGEX-4T-TmTPx,转化大肠杆菌DH5α后筛选阳性克隆,经限制性酶切分析、PCR及测序鉴定后,转化大肠杆菌BL21,以IPTG进行诱导表达,用SDS-PAGE分析表达产物。结果显示,成功表达了大小约为43 ku的融合蛋白。对表达产物纯...

• 单位
  甘肃农业大学; 家畜疫病病原生物学国家重点实验室; 中国农业科学院兰州兽医研究所; 农业部