摘要
目的:建立一种能够快速鉴别中国真龙虱及其混伪品的特异性聚合酶链式反应(PCR)方法。方法:收集中国真龙虱及其混伪品共15批次,提取各样品基因组DNA,测序得到中国真龙虱及其混伪品的COⅠ序列,经比对后筛选出特异性单核苷酸多态性(SNP)变异位点,设计特异性鉴别引物,同时考察影响PCR反应的各项因素。结果:双向测序分别获得中国真龙虱、中华龙虱、达牙甲的COⅠ片段;中国真龙虱特异性引物在296 bp处能扩增出单一清晰的目标条带,而在同样条件下,其混伪品均无此条带出现。结论:该研究所建立的中国真龙虱特异性PCR方法可快速而准确地鉴定中国真龙虱及其混伪品,为后续中国真龙虱药材的质量控制研究奠定了实验基础。
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