牛种布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统对巨噬细胞内质网应激和细胞凋亡的影响

作者：杨琴; 邓肖玉; 谢珊珊; 易继海; 王勇; 张倩; **^*; 陈创夫^*

来源：畜牧兽医学报, 2022, 53(04): 1192-1200.

• 布鲁氏菌
• 缺失株
• T4SS
• 内质网应激
• 细胞凋亡

旨在研究牛种布鲁氏菌Ⅳ型分泌系统(T4SS)对巨噬细胞内质网应激和细胞凋亡的影响，深入探究布鲁氏菌的分子致病机制。本研究以牛种布鲁氏菌疫苗株A19及其T4SS启动子缺失株A19ΔVirB侵染小鼠巨噬细胞，分别在侵染的6、12、24 h收集细胞RNA和总蛋白，通过qRT-PCR以及Western blot检测内质网应激标志性分子(GRP78和CHOP)、凋亡相关分子(BAX和BCL-2)的转录水平和蛋白表达水平；通过流式细胞术检测不同时间点的细胞凋亡情况。结果显示，在侵染的6、12和24 h,缺失株A19ΔVirB组GRP78的转录水平及蛋白表达水平均显著低于亲本株A19组(P<0.05);在侵染后的6 h,缺失株组CHOP的转录水平及蛋白表达水平也显著低于亲本株(P<0.05),但到了24 h,出现了显著高于亲本株(P<0.05)的现象；在侵染的24 h,缺失株A19ΔVirB组BAX的转录水平及蛋白表达水平显著高于亲本株(P<0.05);而在侵染的24 h,缺失株组BCL-2的转录水平及蛋白表达水平显著低于亲本株(P<0.05);流式结果进一步显示，在侵染的24 h,缺失株组的细胞凋亡率显著高于亲本株(P<0.05);本试验的结果表明，T4SS缺失后，会导致牛种布鲁氏菌引起内质网应激的能力减弱，诱导细胞凋亡的能力增强。本研究为进一步解析布鲁氏菌的致病机制奠定了基础，也为今后布鲁氏菌T4SS的功能研究提供了科研依据。

• 单位
  新疆农垦科学院; 石河子大学; 动物科技学院