内含肽介导的重组人干扰素α2a的原核表达及其生物学活性

作者：万一; 张琨; 张月娟; 贺丽清; 赵宁; 訾静

来源：中国生物制品学杂志, 2013, (02): 239-243.

DOI：10.13200/j.cjb.2013.02.100.wany.014

• 干扰素α2a
• 原核细胞
• 基因表达
• 内含肽 Interferon α2a
• Prokaryotic cells
• Gene expression
• Intein

目的原核表达内含肽介导的重组人干扰素α2a(rhIFNα2a)融合蛋白,并检测其生物学活性。方法以质粒pBV220-IFN-α2a为模板PCR扩增rhIFNα2a基因,将其插入原核表达载体pTWIN1的内含肽Ssp DnaB基因下游的多克隆位点,构建重组表达质粒pTWIN1-rhIFNα2a,转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,表达产物进行SDS-PAGE及Western blot分析,并对裂菌上清的生物学活性进行测定。结果双酶切及测序结果显示,融合蛋白基因已克隆入表达载体中;rhIFNα2a蛋白的相对分子质量约44 300,表达量占全菌总蛋白的30%,在裂菌上清中的表达量占目的...

• 单位
  第四军医大学; 陕西省微生物研究所