miR-30a-5p调控HDAC9对心肌细胞氧化应激损伤保护作用的机制研究

作者：余敏; 崔跃; 黎鹏飞; 谢丹; 陈芬^*

来源：河北医药, 2022, 44(08): 1125-1135.

• miR-30a-5p
• HDAC9
• 心肌细胞
• 凋亡
• 氧化应激

目的 探讨miR-30a-5p通过调控组蛋白去乙酰化酶9(HDAC9)对缺氧复氧诱导的心肌细胞凋亡、氧化应激的影响及作用机制。方法 本研究通过体外培养心肌细胞H9c2,建立缺氧复氧损伤细胞模型，细胞分组为：Control组、H/R组、H/R+miR-NC组、H/R+miR-30a-5p组、H/R+si-NC组、H/R+si-HDAC9组、H/R+miR-30a-5p+pcDNA组、H/R+miR-30a-5p+HDAC9组。qRT-PCR检测miR-30a-5p和HDAC9 mRNA表达；Western blot检测HDAC9、Bax和Bcl-2蛋白表达；流式细胞术检测细胞凋亡；ELISA检测超氧化物歧化酶(SOD)活性、丙二醛(MDA)含量和乳酸脱氢酶(LDH)含量；双荧光素酶报告基因检测miR-30a-5p和HDAC9靶向关系。结果 与Control组比较，H/R组的心肌细胞中miR-30a-5p表达、Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05),而细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量、LDH含量HDAC9 mRNA和蛋白表达水平均显著增加(P<0.05);与H/R+miR-NC组比较，H/R+miR-30a-5p组的心肌细胞中miR-30a-5p表达、Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05)。与miR-NC组比较，miR-30a-5p组中HDAC9 3’UTR-wt荧光素酶活性显著降低(P<0.05),而HDAC9 3’UTR-mut荧光素酶活性没有任何变化。与anti-miR-N组比较，anti-miR-30a-5p组中miR-30a-5p表达显著降低(P<0.05)。与miR-NC组比较，miR-30a-5p组中HDAC9蛋白表达显著降低(P<0.05);与anti-miR-N组比较，anti-miR-30a-5p组中HDAC9蛋白表达显著增加(P<0.05)。与Control组比较，H/R组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著增加(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05);与H/R+si-NC组比较，H/R+si-HDAC9组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05)。与H/R+miR-NC组比较，H/R+miR-30a-5p组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著降低(P<0.05),而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著增加(P<0.05);与H/R+miR-30a-5p+pcDNA组比较，H/R+miR-30a-5p+HDAC9组的心肌细胞中HDAC9蛋白表达、细胞凋亡率、Bax蛋白表达、MDA含量和LDH含量均显著增加(P<0.05);而Bcl-2蛋白表达和SOD活性均显著降低(P<0.05)。结论 miR-30a-5p通过下调HDAC9减缓缺氧复氧诱导的心肌细胞H9c2凋亡和氧化应激损，起到保护心肌细胞的作用。

• 单位
  华中科技大学同济医学院附属协和医院