核不均一核糖核蛋白L对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响

作者：刘纪雷; 谢志文; 郭莉莉; 袁晓琳; 唐洁; 韩小幸; 刘庆庆; 魏士刚^*; 付东杰

来源：中华实验外科杂志, 2023, 40(11).

• 核不均一核糖核蛋白L
• 口腔鳞状细胞癌
• 增殖
• 迁移
• 侵袭

目的探讨核不均一核糖核蛋白L(hnRNPL)对口腔鳞状细胞癌细胞增殖、迁移和侵袭的影响。方法采用蛋白质免疫印迹(Western blot)和荧光定量聚合酶链反应(PCR)分析正常口腔上皮细胞(HOK)和口腔鳞状细胞癌细胞系(HSC3、CAL27、SCC15、HN13)中hnRNPL蛋白和信使RNA(mRNA)表达水平;以CAL27细胞作为研究对象, 采用对照短发卡RNA(shRNA)和hnRNPL shRNA慢病毒感染CAL27细胞, 建立对照组和hnRNPL KD组细胞, 采用细胞计数试剂盒(CCK-8)和EdU染色法检测两组细胞的增殖能力;采用流式细胞术分析两组细胞的凋亡水平;采用划痕实验和Transwell分析两组细胞的迁移和侵袭能力;采用Western blot和荧光定量PCR分析两组细胞p53、B细胞淋巴瘤/白血病-2(bcl-2)和黏着斑激酶(FAK)蛋白和mRNA表达水平。组间比较采用t检验。结果口腔鳞状细胞癌细胞系(HSC3、CAL27、SCC15、HN13) hnRNPL蛋白表达水平(1.40±0.12、1.81±0.16、1.38±0.09、1.39±0.10)明显高于正常口腔上皮细胞(HOK, 0.97±0.12), 差异有统计学意义(t=6.451、10.230、6.729、6.707, P<0.05)。口腔鳞状细胞癌细胞系(HSC3、CAL27、SCC15、HN13) hnRNPL mRNA表达水平(1.47±0.13、2.04±0.22、1.59±0.10、1.42±0.08)明显高于正常口腔上皮细胞(HOK, 0.99±0.05), 差异有统计学意义(t=8.307、11.260、13.820、11.560, P<0.05)。对照组细胞吸光度(A)值(2.04±0.13)明显高于hnRNPL KD组细胞(1.61±0.11), 差异有统计学意义(t=6.322, P<0.05)。对照组细胞EdU阳性率[(70.47±10.42)%]明显高于hnRNPL KD组[(43.71±4.54)%], 差异有统计学意义(t=5.765, P<0.05)。对照组细胞凋亡率[(3.72±1.10)%]明显低于hnRNPL KD组[(11.81±2.43)%], 差异有统计学意义(t=7.427, P<0.05)。对照组细胞愈合率[(86.55±4.66)%]明显高于hnRNPL KD组[(57.34±6.20)%], 差异有统计学意义(t=9.224, P<0.05)。对照组细胞迁移数量[(106.50±7.66)个]明显高于hnRNPL KD组[(77.83±6.18)个], 差异有统计学意义(t=7.135, P<0.05)。对照组细胞p53和bcl-2蛋白表达水平(0.69±0.08、0.80±0.08)明显低于hnRNPL KD组(1.07±0.14、1.30±0.12), 差异有统计学意义(t=7.135、7.135, P<0.05)。对照组细胞FAK蛋白表达水平(1.16±0.14)明显高于hnRNPL KD组(0.66±0.07), 差异有统计学意义(t=7.943, P<0.05)。结论 hnRNPL在口腔鳞状细胞癌中呈高表达, 促进口腔鳞状细胞癌的增殖、迁移和侵袭等过程。

• 单位
  武汉大学人民医院; 河南中医药大学