ECE2通过上调E2F1和MYC来促进乳腺癌细胞的增殖和迁移

作者：顾芯烨; 吴旦平; 江波; 商江峰; 蒋国勤; 魏金荣; 李华^*

来源：现代检验医学杂志, 2021, 36(04): 39-44.

• 乳腺癌
• 内皮素转化酶2
• E2F1
• MYC
• 增殖
• 迁移

目的通过检测内皮素转化酶2(ECE2)在乳腺癌中的表达,探究其对乳腺癌细胞增殖、迁移的影响及潜在分子机制。方法选取20例临床乳腺癌组织及其对应癌旁正常组织样本,通过qRT-PCR检测ECE2基因在乳腺癌组织中的表达特征。通过siRNA介导敲低ECE2表达,利用细胞增殖实验、克隆形成实验、划痕迁移实验和细胞周期实验分别验证敲低ECE2表达对乳腺癌细胞增殖、克隆形成、迁移及凋亡的影响。通过分析与ECE2共表达基因参与的信号通路,探索ECE2在乳腺癌发展进程中的潜在分子机制,进一步通过细胞增殖回补实验进行验证。结果 20例临床乳腺癌组织中ECE2表达较癌旁正常组织显著上调(30.342±6.564 vs 21.753±8.244),差异有统计学意义(t=3.645,P=0.000)。转染敲低ECE2表达后,siECE2#1组和siECE2#2组在24,48,72 h的吸光度值较对照组明显降低,差异有统计学意义(F=71.409～211.681,均P <0.01)。siECE2#1组(0.515±0.014)和siECE2#2组(0.511±0.006)细胞克隆形成速率明显低于对照组(3.473±0.147),差异有统计学意义(F=467.152,P <0.001)。siECE2#1组(56.423±1.137)和siECE2#2组(42.036±0.754)细胞迁移愈合速率显著低于对照组(78.124±1.352),差异有统计学意义(F=805.162,P <0.001)。siECE2#1组和siECE2#2组细胞凋亡率较对照组明显降低,细胞周期显著阻滞在G1期。siECE2#1组和siECE2#组细胞中E2F1 mRNA和蛋白表达水平明显低于对照组,差异均有统计学意义(F=703.020,136.301,均P<0.001);MYC mRNA和蛋白表达水平也明显低于对照组(F=613.395,102.573,均P <0.001)。在敲低ECE2表达的乳腺癌细胞中分别回补E2F1和MYC后,细胞增殖速率回归至正常水平。结论 ECE2高表达诱导促癌基因E2F1和MYC的高表达进而促进乳腺癌细胞的增殖及迁移,阻碍细胞周期停滞在G1期,参与乳腺癌的发展进程。

• 单位
  苏州大学附属第二医院; 常熟市第一人民医院