重组血红素加氧酶-2在大肠杆菌中表达与纯化方法的研究

作者：滕悦秋; 王秀宏; 赵炜明; 王志刚; 刘明; 周虹

来源：哈尔滨医科大学学报, 2004, (01): 1-4.

• 血红素加氧酶
• 大肠杆菌
• 表达
• 纯化

目的　确定重组血红素加氧酶 2在大肠杆菌中表达与纯化方法。方法　将已构建的血红素加氧酶 2(HO 2 )的重组质粒pMW1 72a HO 2转入大肠杆菌BL 2 1 ,分析不同温度及摇床转速对HO 2表达的影响 ,确定可溶性表达最佳条件。使用超声波、超速离心、分级盐析、分子筛层析等方法纯化HO 2。检测酶活性。结果　确定了HO 2可溶性表达最佳条件为 37℃ ,(85± 5 )r min ;确定了HO 2具体纯化路线。得到蛋白纯度为 95 .0 % ,纯化倍数为 2 .9倍 ,收得率为 4 0 .9%的活性HO 2蛋白。结论　获得了纯度高、具有活性的HO 2蛋白 ,为进一步进行HO 2结构与功能之间关系的研究提供了可行的纯化路线

• 单位
  军事医学科学院; 哈尔滨医科大学