二氢石蒜碱对棕榈酸诱导H9c2细胞炎性损伤的保护作用及其机制

作者：徐文芳; 金红花^*

来源：中药材, 2022, 45(10): 2460-2465.

DOI：10.13863/j.issn1001-4454.2022.10.032

• 二氢石蒜碱
• 棕榈酸
• H9c2细胞炎性损伤
• TLR4
• p-PI3K
• p-AKT
• p-mTOR
• 活性氧

目的：研究二氢石蒜碱对棕榈酸诱导H9c2细胞炎性损伤的影响并探讨其机制。方法：建立棕榈酸诱导H9c2细胞炎性损伤细胞模型，采用CCK-8法筛选二氢石蒜碱的最佳给药浓度。将培养的H9c2细胞随机分为正常对照组、模型组、LY294002组、雷帕霉素组及二氢石蒜碱低、中、高浓度组。蛋白免疫印迹法检测H9c2细胞中TLR4、p-PI3K、p-AKT、p-mTOR蛋白表达；免疫荧光染色及流式细胞术检测二氢石蒜碱对棕榈酸诱导H9c2细胞内活性氧(ROS)产生水平的影响。结果：采用棕榈酸100μmol/L建立H9c2细胞炎性损伤模型，CCK-8实验筛选出二氢石蒜碱组在1、10、50μmol/L下细胞存活率都在80%以上，分别确定为低、中、高给药浓度。蛋白免疫印迹实验表明，二氢石蒜碱预处理能显著下调棕榈酸诱导下H9c2细胞的TLR4、p-PI3K、p-mTOR蛋白表达，上调p-AKT蛋白表达(P<0.05或P<0.01),其作用呈浓度依赖性；PI3K/AKT抑制剂LY294002可抑制p-AKT蛋白表达，mTOR抑制剂雷帕霉素可抑制p-mTOR蛋白表达(P<0.01)。免疫荧光染色及流式细胞术结果表明二氢石蒜碱对炎性损伤H9c2细胞内ROS产生有显著的抑制作用(P<0.01)。结论：二氢石蒜碱对棕榈酸诱导的H9c2细胞炎性损伤具有保护作用，其机制可能与抑制TLR4、p-PI3K、p-mTOR蛋白表达，促进AKT蛋白磷酸化，抑制炎性损伤H9c2细胞内ROS的产生相关。

• 单位
  延边大学; 延边大学附属医院