IDH2野生型/突变型基因慢病毒包装及鉴定研究

作者：王世雄; 乔健英; 刘雪雪; 曹相玫^*

来源：现代医药卫生, 2019, 35(19): 2929-2935.

• 异柠檬酸脱氢酶
• 突变型
• 野生型
• 肿瘤
• 慢病毒
• 包装

目的构建异柠檬酸脱氢酶2(IDH2)野生型/突变型基因慢病毒载体。方法构建IDH2野生型、突变型质粒,采用聚合酶链反应(PCR)进行鉴定;对感染293T细胞,测定病毒滴度;对感染HEK293细胞,观察感染效率。结果 PCR鉴定结果显示,2组重组质粒在1.0～2.0kb间各出现一条明显扩增带,片段大小与IDH2目的片段大小一致(1 359bp)。对感染293T细胞观察发现,48h后绿色荧光的强度和范围明显增加;病毒滴度为:1.0×108 TU/mL。感染HEK293细胞的效率在90%以上。结论 IDH2野生型和突变型慢病毒构建成功,能够高效地感染细胞。

• 单位
  基础医学院; 宁夏医科大学