骨髓基质细胞中Von Hippel-Lindau基因的siRNA表达载体构建及其检测

作者：邹多宏; 赵君; 夏伦果; 张秀丽; 蒋欣泉; 黄远亮

来源：上海口腔医学, 2010, (04): 403-409.

• VonHippel-Lindau基因
• 骨髓基质细胞
• siRNA干扰
• 低氧诱导因子 Von Hippel-Lindau gene
• Bone marrow stromal cells
• siRNA interference
• Hypoxia inducible factor

目的:构建骨髓基质细胞(bone marrow stromal cells BMSCs)中Von Hippel-Lindau(VHL)基因的siRNA表达载体并检测其对BMSCs细胞中VHL基因的干扰作用。方法:根据犬的VHL基因序列设计并合成4对siRNA oligo,然后用载体构建试剂盒进行重组克隆,将4对双链的siRNA oligo分别插入到siRNA表达载体pcDNATM6.2-GW/EmGFPmiR中,构建4个siRNA表达质粒(SR144-1,SR144-2,SR144-3,SR144-4)。用载体通用引物进行菌落PCR筛选,筛选得到的阳性克隆进行测序,以验证重组克隆中插入片段序列...

• 单位
  同济大学; 同济大学附属东方医院; 上海交通大学医学院附属第九人民医院