非洲猪瘟病毒MGF360-9L蛋白多克隆抗体的制备及其对病毒复制的影响

作者:杨博; 申超超; 张婷; 郝雨; 杨金柯; 崔卉梅; 赵登率; 袁兴国; 陈学辉; 鲍恩东*; 张克山*; 郑海学; 刘湘涛
来源:中国兽医科学, 2022, 52(03): 324-332.
DOI:10.16656/j.issn.1673-4696.2022.0045

摘要

为制备非洲猪瘟病毒(ASFV) MGF360-9L蛋白的多克隆抗体并评价其对病毒复制的影响,使用DNAStar 2.1软件预测MGF360-9L的抗原表位,选择并合成了符合抗原要求的MGF360-9L C端多肽CKNLSIAHKHYINDGFND,制备MGF360-9L家兔源多克隆抗体。随后采用实时荧光定量PCR方法、血细胞吸附试验和Western-blot方法等评价MGF360-9L的多克隆抗体对病毒复制的影响。结果显示,不同稀释倍数的MGF360-9L多克隆抗体在不同感染时间下均可显著降低病毒的拷贝数、效价以及D1133L和B646L(p72)两种病毒蛋白的表达,并且抗体稀释度越低,降低病毒拷贝数、效价以及病毒蛋白表达的作用越强。此外,不同稀释倍数的MGF360-9L多克隆抗体均可抑制感染重组病毒ASFV-GFP的猪肺泡巨噬细胞中绿色荧光蛋白的产生。结果表明,与阴性家兔血清相比,不同稀释倍数的MGF360-9L抗体均可显著抑制ASFV的复制。本研究为ASFV靶向药物和疫苗的研发提供了参考依据。

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