pAAV-PEG3-sTRAIL质粒的构建及表达研究

作者：蒋祥龙; 彭炬; 潘艺; 卢光琇

来源：中国现代医学杂志, 2010, (04): 481-484+489.

• PEG3
• sTRAIL
• 凋亡
• 胚胎干细胞
• NTERA-2 sTRAIL
• PEG3
• apoptosis
• hESCs
• NTERA-2

目的构建pAAV-PEG3-sTRAIL质粒并检测其诱导细胞凋亡的作用。方法从大鼠尾巴中提取gDNA,PCR扩增PEG3启动子,测序后定向替代pAAV载体中的CAG启动子。从培养的NTERA-2细胞中提取总RNA,RT-PCR扩增sTRAIL基因(编码氨基酸序列114-281),测序后定向插入至pAAV-PEG3质粒的多克隆位点。用pAAV-PEG3-sTRAIL质粒FUGENE HD转染人hSF、NTERA-2和hES细胞,用半定量RT-PCR和流式细胞仪分别检测sTRAIL基因的表达和细胞的早期凋亡。结果限制性内切酶酶切和测序分析证实,本文成功地获得了PEG3启动子和sTRAIL基因片断,...

• 单位
  人类干细胞国家工程研究中心; 中南大学