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摘要
目的将大鼠骨髓间充质干细胞(MSC),经重组腺病毒载体Ad-IL-12转染,构建Ad-IL-12-MSC。方法 Percoll法分离与培养大鼠MSC,流式细胞仪测定细胞表面标志CD29,CD44,CD34。以重组腺病毒载体Ad-IL-12转染MSC,RT-PCR、Western Blott检测转染后IL-12基因mRNA和蛋白的表达。结果分离所得的大鼠MSCs细胞组成比较均一。流式细胞仪检测3种MSCs的表面抗原标志,CD29和CD44,阳性率分别达97.1%和98.2%,而CD34的阳性率仅为4.4%。转染后,Ad-IL-12-MSC细胞IL-12基因在mRNA水平和蛋白质水均有表达。结论 Percoll法分离与培养MSC较为可靠且简单,构建的Ad-IL-12-MSC能成功表达IL-12。
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单位大连大学附属新华医院
