蛋白激酶Cβ抑制剂LY333531对糖尿病大鼠造影剂肾病的保护作用

作者：蔡学英; 殷婷; 朱英; 刘炳炜; 胡炜^*

来源：中华危重症医学杂志(电子版), 2020, 13(06): 412-418.

DOI：10.3877/cma.j.issn.1674-6880.2020.06.003

• 糖尿病
• 造影剂肾病
• 蛋白激酶C
• 大鼠

目的探讨蛋白激酶Cβ(PKCβ)抑制剂LY333531对造影剂诱导的糖尿病大鼠急性肾损伤的保护作用及其机制。方法将40只大鼠分为健康对照组(C组)、糖尿病组(D组)、糖尿病造影剂组(DC组)以及糖尿病+Y333531+造影剂组(DCL组),每组各10只。对D组、DC组及DCL组大鼠腹腔注射2%链脲佐菌素(60 mg/kg)建立糖尿病模型;对DCL组大鼠给予LY333531灌胃预处理(10 mg·kg-1·d-1),持续14 d;对DC组与DCL组大鼠进行尾静脉注射76%复方泛影葡胺(10 ml/kg),建立造影剂肾病模型。苏木素-伊红(HE)染色观察各组大鼠肾组织病理变化;检测各组大鼠血糖、血肌酐、尿微量白蛋白(m Alb)和N-乙酰-β-D-葡萄糖苷酶(NAG)水平;采用实时荧光定量PCR法检测转化生长因子β1 (TGFβ1)、Smad3、Smad7、Bax、Caspase3和Bcl2的信使RNA(mRNA)表达水平;采用Western-blotting检测TGFβ1、Bax、Caspase3、Bcl2蛋白及磷酸化PKCβ(pPKCβ)/PKCβ、磷酸化p38(p-p38)/p38的比值。结果 HE结果显示,C组大鼠肾小球、肾小管结构正常;D组大鼠肾组织内肾小球及肾小管结构形态较为完整,间质周围极少量炎症细胞;DC组肾小管上皮细胞脱落、周围炎症细胞浸润明显;DCL组大鼠肾小管上皮细胞脱落程度明显降低,肾小管及肾小球周围间质少量炎症细胞浸润。各组大鼠间血糖、血肌酐、尿m Alb、尿NAG水平、TGFβ1蛋白及其m RNA、Smad3 m RNA、Smad7 m RNA、Bax蛋白及其m RNA、Caspase3蛋白及其m RNA、Bcl2蛋白及其m RNA表达水平、p PKCβ/PKCβ和p-p38/p38比值间比较,差异均有统计学意义(F=67.976,P <0.001;F=27.155,P <0.001;F=41.201,P <0.001;F=59.635,P <0.001;F=21.073,P <0.001;F=28.365,P <0.001;F=15.215,P <0.001;F=36.273,P <0.001;F=14.489,P <0.001;F=23.172,P <0.001;F=17.103,P <0.001;F=29.916,P <0.001;F=12.026,P <0.001;F=13.368,P <0.001;F=6.126,P=0.002;F=6.434,P=0.002)。进一步两两比较发现,D组、DC组以及DCL组大鼠的血糖水平较C组大鼠均明显升高(P均<0.05);与DC组大鼠比较,DCL组大鼠的的血肌酐、尿m Alb、尿NAG水平、TGFβ1蛋白及其m RNA、Smad3 m RNA、Bax蛋白及其m RNA、Caspase3蛋白及其m RNA、p PKCβ/PKCβ和p-p38/p38比值均显著降低,而Smad7 m RNA、Bcl2蛋白及其m RNA表达水平均显著升高(P均<0.05)。结论 PKCβ抑制剂LY333531能通过抑制PKCβ-TGFβ-p38-Caspase3通路改善造影剂诱导的糖尿病大鼠急性肾损伤。

• 单位
  江苏省人民医院; 杭州市第一人民医院; 浙江大学; 南京医科大学第一附属医院