姜黄素衍生物C66对转化生长因子-β刺激的大鼠肝星状细胞增殖和活化的研究

作者：陈泽; 陈达之; 萧云蕾; 肖茜茜; 王永林; 许烂漫; 陈永平

来源：中华传染病杂志, 2017, 35(08): 492-497.

• 姜黄素衍生物
• 肝星状细胞
• 肝纤维化
• c-jun氨基末端激酶

目的观察姜黄素衍生物C66对TGF-β刺激的大鼠肝星状细胞(HSC)增殖及α-平滑肌动蛋白(α-SMA)、Ⅰ型胶原表达的影响及其与大麻素受体(CB)1的关系。方法体外培养HSC-T6细胞,分为对照组、C66不同浓度组(1、2、5、10和20μmol/L),细胞计数试剂盒-8检测其吸光度(A)值。选取最佳C66作用浓度及时间,分为对照组、TGF-β干预组、TGF-β+CB1拮抗剂组、TGF-β+C66干预组、TGF-β+CB1拮抗剂+C66联合干预组,分别培养48 h,以蛋白质印迹法、实时荧光定量PCR检测CB1、α-SMA、Ⅰ型胶原蛋白及mRNA的表达,以蛋白质印迹法检测磷酸化c-jun氨基末端激酶(p-JNK)、cjun氨基末端激酶(JNK)表达水平。多样本均数方差齐性者采用LSD法进行两两比较,方差不齐者采用DunnettT3检验,组间比较采用单因素方差分析。结果 C66能有效抑制HSC-T6增殖,呈现浓度和时间依赖性,其中10μmol/LC66作用48 h对HSC-T6的抑制效果最明显,抑制率为.54%。与对照组相比,单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA蛋白表达明显升高,差异均有统计学意义(t值分别为6.188、3.48和20.64,均P<0.05)。与对照组相比,单独TGF-β1干预组CB1、Ⅰ型胶原、α-SMA mRNA相对表达显著升高,差异均有统计学意义(t值分别为4.705、9.492和38.27,均P<0.05)。与对照相组比,TGF-β1干预组p-JNK水平显著升高,差异有统计学意义(t=9.567,P<0.05)。结论 C66能有效抑制HSC-T6细胞的增殖及胶原合成,且联合使用CB1拮抗剂效果更明显,该过程可能涉及JNK磷酸化水平的调节,有助于理解肝纤维化发生、发展的机制及为治疗肝纤维化寻找新的靶点。

• 单位
  温州医科大学; 温州医科大学附属第一医院