毛蕊花苷对小鼠异位心脏移植冷缺血再灌注损伤的影响：与NF-κB/NLRP3信号通路的关系

作者：张羽茜; 赵晓帅; 田浩; 邱珍; 雷少青; 夏中元^*

来源：中华麻醉学杂志, 2023, 43(10).

• 毛蕊花属
• 心脏移植
• 再灌注损伤
• NF-κB
• NLR家族, 热蛋白结构域包含蛋白3

目的评价毛蕊花苷对小鼠异位心脏移植冷缺血再灌注损伤的影响及其与NF-κB/NOD样受体蛋白3(NLRP3)信号通路的关系。方法动物实验:SPF级健康雄性C57BL/6小鼠18只, 6～8周龄, 体质量24～28 g, 采用随机数字表法分为3组(n=6):对照组(C组)、心脏移植冷缺血再灌注组(I/R组)和心脏移植冷缺血再灌注+毛蕊花苷组(I/R+VB组)。采用cuff套管法颈部异位心脏移植的方法制备小鼠心脏移植冷缺血再灌注损伤模型, C组供体心脏取下后立即移植至受体, I/R组供体心脏于4 ℃保存液保存8 h后移植至受体, I/R+VB组供体与受体小鼠分别于术前3 d时腹腔注射毛蕊花苷20 mg/kg。于再灌注24 h时进行移植物跳动评分后取移植心脏心肌组织, 采用ELISA法检测MDA含量和SOD活性;取部分供体心肌组织, 观察病理学结果;采用Western blot法检测NF-κB、p-NF-κB、NLRP3、ACS和caspase-1的表达;RT-PCR法检测IL-1β、TNF-α及IL-6 mRNA的表达。细胞实验:建立大鼠心肌细胞H9c2冷缺氧复氧模型, 采用随机数字表法将细胞分为3组(n=24):对照组(C组)、冷缺氧复氧组(H/R组)、冷缺氧复氧+毛蕊花苷组(H/R+VB组)。采用10 ℃缺氧18 h, 37 ℃复氧24 h的方法建立冷缺氧复氧模型, 检测细胞活力和LDH活性;Western blot法检测NF-κB和NLRP3的表达;免疫荧光染色法检测p-NF-κB的表达。结果动物实验:与C组比较, I/R组MDA含量升高, 移植物跳动评分和SOD活性降低, p-NF-κB、NLRP3、ACS和caspase-1表达、IL-1β、TNF-α及IL-6 mRNA表达上调(P<0.05), 心肌组织病理学损伤加重;与I/R组比较, I/R+VB组MDA含量降低, 移植物跳动评分和SOD活性升高, p-NF-κB、NLRP3、ACS和caspase-1表达、IL-1β、TNF-α及IL-6 mRNA表达下调(P<0.05), 心肌组织病理学损伤减轻。细胞实验:与C组比较, H/R组细胞活力降低, LDH活性升高, p-NF-κB、NLRP3、ACS、caspase-1和p-NF-κB表达上调(P<0.05);与H/R组比较, H/R+VB组细胞活力升高, LDH活性降低, p-NF-κB、NLRP3、ACS、caspase-1和p-NF-κB表达下调(P<0.05)。结论毛蕊花苷可减轻小鼠异位心脏移植冷缺血再灌注损伤, 其机制与抑制NF-κB/NLRP3信号通路激活有关。

• 单位
  武汉大学人民医院