优化和验证人精浆miRNAs提纯方法

作者：闫丽; 张瑶楠; 张蔚; 陈娟; 高丽娜; 陆彩玲; 刘美玲

来源：生殖医学杂志, 2017, (06): 568-572.

DOI：10.3969/j.issn.1004-3845.2017.06.012

• 精浆
• miRNAs
• 实时定量PCR
• miR-106b Seminal plasma
• miRNAs
• Real-time quantitative PCR
• miR-106b

目的优化精浆miRNAs提纯方法,为后续实验奠定基础。方法收集国家卫生计生委科研所生殖健康服务中心正常精液样本5例,非梗阻性无精子症(NOA)患者(经北京大学第三医院检查确诊)精液样本22例。根据不同RNA提取方法分为4组:Trizol LS组、蛋白酶K+Trizol LS组、miRNeasy Micro kit组及Trizol LS+miRNeasy Micro kit联合使用组(改良组)。比较4组提纯NOA患者精浆RNA的OD260/280,使用Agilent2100生物分析仪检测改良法提纯精浆miRNAs的纯度和质量,采用实时定量PCR方法比较4组精浆miR-106b的溶解曲线,并比较精...

• 单位
  北京协和医学院; 国家卫生计生委科学技术研究所