肿瘤靶向FoxM1-DBDp蛋白的噬菌体随机肽库筛选与分子模拟

作者：付鹏德; 邬怡然; 王思怡; 李良建; 郭红萍; 崔健; 茆灿泉^*

来源：华西药学杂志, 2019, 34(06): 559-563.

DOI：10.13375/j.cnki.wcjps.2019.06.002

• FoxM1-DBDp
• 噬菌体随机肽库
• 生物淘选
• 多肽
• 分子对接
• 反筛测定
• 细胞生长抑制率
• 肿瘤

目的从噬菌体随机十二肽库中筛选和获得分子靶向FoxM1-DBDp重组蛋白的高亲和力和肿瘤细胞毒性作用的多肽小分子。方法通过IPTG诱导、原核细菌体外重组表达和Ni-NTA亲和纯化,获得FoxM1-DBDp结合结构域蛋白;以其为靶标对噬菌体随机十二肽库进行四轮生物淘选,获取噬菌斑单克隆,反筛测定阳性克隆与靶蛋白亲和力;采用Discovery Studio 3.0 (DS 3.0)分子模拟对接并用CCK-8测定高亲和力多肽对肿瘤细胞的抑制作用。结果经过四轮生物淘选,高亲和力噬菌体明显得到富集;成功测序了15条序列。反筛测定结果表明:多肽P15具有较高的亲和力;DS分子模拟对接发现该序列与FoxM1-DBD具有最低的结合自由能。CCK-8测定结果显示:100μg·mL-1处理浓度下,P15多肽对肝癌HepG2细胞的抑制率达75.52%。结论通过噬菌体随机十二肽库筛选,成功筛选获得了多条分子靶向FoxM1-DBDp的高亲和力多肽序列,为分子靶向肿瘤密切相关FoxM1的多肽先导药物的研发提供了重要的前期理论基础。

• 单位
  西南交通大学