摘要
本研究依托布设于黄土高原的长期定位试验, 以紫花苜蓿(Medicago sativa)不同种植年限(2年、9年和18年)土壤为研究对象, 玉米(Zea mays)地为对照, 基于高通量测序技术和荧光定量PCR技术, 结合冗余分析和分子生态网络构建, 通过微生物标志物(nirK和nirS)对黄绵土区玉米农田和长期种植苜蓿土壤反硝化细菌群落结构和多样性展开研究。结果表明, 黄绵土区nirK基因丰度明显高于nirS基因丰度, 具有nirK和nirS基因的反硝化细菌主要隶属于变形菌门(Proteobacteria), nirK型反硝化细菌已分类优势属为副球菌属(Paracoccus, 1.10%~39.94%)、无色杆菌属(Achromobacter, 0.07%~12.50%)和中华根瘤菌属(Sinorhizobium, 0.50%~7.60%), 且苜蓿地中副球菌属相对丰度显著高于玉米农田(P<0.05), 随苜蓿种植年限延长相对丰度逐渐增加; 无色杆菌属相对丰度表现为苜蓿土壤显著低于玉米农田(P<0.05), 丰度随苜蓿种植年限的延长逐渐降低; nirS型反硝化细菌优势属为罗河杆菌属(Rhodanobacter,1.45%~5.19%)。相关性分析表明, nirK反硝化基因丰度变化对土壤环境因子无明显响应, 而nirS反硝化基因丰度与土壤有机碳、全氮和微生物量碳呈显著正相关, 与土壤水分和有效磷呈显著负相关; 冗余分析结果表明, 土壤水分(P=0.002)和有机碳(P=0.02)是nirK型反硝化细菌群落组成变化的主导因子, 土壤有效磷(P=0.006)是nirS型反硝化细菌群落结构的产生变化的主导因子。分子生态网络分析表明, 黄绵土区nirK型和nirS型反硝化细菌群落间均以协同合作关系为主。长期种植苜蓿显著影响土壤中反硝化细菌的群落组成, 研究结果为深入探索半干旱区土壤反硝化过程中的微生物机制提供了重要科学依据。
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