脊髓灰质炎病毒颗粒分离纯化方法学评价

作者：曾智坤; 喻刚; 王继麟; 陈晓琦^*

来源：中国生物制品学杂志, 2020, 33(03): 312-315.

DOI：10.13200/j.cnki.cjb.003013

• 氯化铯
• 蔗糖
• 碘克沙醇
• 密度梯度离心
• 空心颗粒
• 实心颗粒
• 纯化

目的比较3种不同密度梯度离心方法对脊髓灰质炎病毒空心颗粒、实心颗粒的分离效果。方法选择蔗糖密度梯度离心、氯化铯密度梯度离心、Optiprep(碘克沙醇溶液)密度梯度离心方法,对脊髓灰质炎病毒进行纯化,抽取离心之后的蛋白条带,通过计算蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒颗粒透射电镜观察,评价其对病毒空心颗粒、实心颗粒的分离效果。结果病毒液经蔗糖、氯化铯和Optiprep 3种介质超速离心,均能分离空心颗粒和实心颗粒。氯化铯密度梯度离心法蛋白回收率优于Optiprep及蔗糖密度梯度离心法;Optiprep密度梯度离心法蛋白纯度优于氯化铯及蔗糖密度梯度离心法。结论通过蛋白回收率、SDS-PAGE分析、病毒颗粒透射电镜观察初步评价了3种方法对脊髓灰质炎病毒空心颗粒和实心颗粒的分离效果,为脊髓灰质炎病毒分离纯化提供了参考。

• 单位
  武汉生物制品研究所有限责任公司; 武汉大学中南医院