苯并[a]芘恶性转化细胞THBEc1致裸小鼠原位肺癌模型的构建及血清人源神经纤维网蛋白2对该模型的诊断价值

作者：邢云昆; 马雪; 姚碧云; 付娟玲; 赵鹏^*; 祁妍敏^*

来源：中国药理学与毒理学杂志, 2023, 37(11): 853-860.

• 原位肺癌模型
• BALB/c-nu裸小鼠
• 神经纤维网蛋白2
• THBEc1细胞

目的 建立苯并[a]芘(Ba P)恶性转化人支气管上皮细胞T-16HBE-C1(THBEc1)的裸小鼠原位肺癌模型，评估血清人源神经纤维网蛋白2(NRP2)对该模型的诊断价值。方法 12只雄性ICR小鼠随机分为3组，右肺分别一次性注射无菌生理盐水20,30和40μL，观察14 d内小鼠死亡数，以确定小鼠肺内注射安全体积。16只雄性BALB/c-nu裸小鼠随机分为4组：对照组[皮下和肺内同时一次性接种人支气管上皮16HBE(HBE)细胞，皮下1×106，肺内2×105]、皮下荷瘤模型组(皮下一次性接种THBEc1细胞1×106)、原位肺癌模型组(肺内一次性接种THBEc1细胞2×105或5×105)。接种后每7 d监测小鼠体重和皮下肿瘤体积；HE染色检测肺肿瘤和皮下肿瘤组织病理特征，计算成瘤率；酶联免疫吸附实验(ELISA)检测裸小鼠血清和胸水中人源NRP2水平；采用受试者工作特征(ROC)曲线确定血清人源NRP2对THBEc1细胞导致的裸小鼠原位肺癌模型的诊断价值。结果 肺内注射40μL无菌生理盐水可致2/4小鼠死亡，20和30μL组未见小鼠死亡，但整体表现欠佳，故后续实验注射体积选择20μL。对照组裸小鼠均未在接种部位检出肿瘤，小鼠体重持续增长；皮下荷瘤模型组祼小鼠全部成瘤，体重显著低于对照组(P<0.05)。接种细胞后第10天，原位肺癌模型5×105细胞组裸小鼠全部成瘤(4/4)；第14天，原位肺癌模型2×105细胞组裸小鼠3/4成瘤，且2个剂量组小鼠体重均低于对照组(P<0.01,P<0.05)，肿瘤组织均呈鳞状细胞癌特征。ELISA结果显示，对照组裸小鼠血清人源NRP2水平均显著低于皮下荷瘤模型(4只)和原位肺癌模型(7只)裸小鼠(P<0.05)。原位肺癌模型组(4只)裸小鼠胸水中均可检出高水平的人源NRP2。ROC曲线显示，血清人源NRP2水平能有效区分THBEc1细胞在裸小鼠肺内是否成瘤，最佳截断值为123.00 ng·L-1。结论 通过肺内注射接种THBEc1细胞建立了裸小鼠原位肺癌模型，血清人源NRP2可用于该模型诊断。

• 单位
  中国民用航空局民用航空医学中心; 公共卫生学院; 北京大学