基于原核表达鸭瘟病毒gC蛋白建立的表面等离子共振检测技术的研究

作者：徐超^*; 王超群; 段志刚; 张子宏; 李轲

来源：中国兽医科学, 2020, 50(12): 1509-1514.

DOI：10.16656/j.issn.1673-4696.2020.0214

• 鸭瘟
• 原核表达
• gC蛋白
• 表面等离子共振
• 检测

本研究旨在应用表面等离子共振技术(surface plasmon resonance,SPR)建立鸭瘟血清的SPR检测方法。PCR扩增鸭瘟g C基因全长,亚克隆于原核表达载体pET32a中,诱导、表达、纯化鸭瘟g C蛋白,将其作为捕获蛋白偶联芯片,建立了鸭瘟的SPR检测方法。敏感性、特异性和实用性分析结果显示,该SPR方法仅与鸭瘟阳性血清有明显反应,而对鸭流感病毒、番鸭细小病毒、传染性喉气管炎病毒、小鹅瘟病毒、马立克病毒、鸭源沙门菌和鸭源大肠杆菌等血清为阴性反应;倍比稀释鸭瘟阳性血清,SPR的灵敏度可达0.1?g;对留存的19份疑似鸭瘟血清的SPR检测与商业化ELISA的检测结果完全一致。上述结果表明,本研究建立的表面等离子共振技术具有灵敏度高、特异性强、稳定性好、样品免标记等特点,适用于鸭瘟血清的快速检测。