摘要
目的探讨含2型胶原蛋白(Col2)、硫酸软骨素(CS)和(或)透明质酸(HA)的软骨仿生基质材料,在体外条件下对大鼠骨髓间充质干细胞(BMSC)分化为软骨细胞样细胞的影响。方法体外培养BMSC,分别接种于对照材料、含Col2、Col2-CS、Col2-HA、Col2-CS-HA的软骨仿生基质材料。诱导7、14、21、28 d后,采用CCK-8法检测各复合基质对BMSC增殖、分化活性的影响;采用反转录PCR技术检测软骨细胞标志物Col2、Y染色体性别决定区相关高迁移率组基因9(SOX9)及聚集蛋白聚糖(aggrecan)的mRNA水平,免疫荧光技术检测Col2、SOX9及aggrecan的蛋白水平。结果 CCK-8法检测结果显示,以Col2为基础的基质材料都能作为BMSC生长的良好细胞外基质,CS和HA使BMSC的增殖活性逐渐增加;各复合基质材料均能在体外有效诱导BMSC向软骨细胞样细胞分化;Col2-CS-HA包被能够最大程度上调Col2、SOX9及aggrecan mRNA及蛋白的水平。结论以Col2为基础的仿生基质材料可在体外有效诱导大鼠BMSC分化为软骨细胞样细胞,其中以复合Col2-CS-HA基质材料效率最高。
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单位南华大学附属第一医院; 西南医院; 第三军医大学