脑络欣通促进氧糖剥夺/再灌注损伤大鼠的脑微血管内皮细胞血管新生:基于激活caspase-1/Gasdermin D通路

作者：李佩佩; 胡音琦; 刘佳; 王丽娜; 吴元洁; 胡建鹏^*

来源：南方医科大学学报, 2023, 43(07): 1093-1101.

• 脑络欣通
• 脑微血管内皮细胞
• 氧糖剥夺/再灌注
• 血管新生
• 细胞焦亡
• 血管内皮生长因子

目的 探讨脑络欣通（NLXTD）含药血清对氧糖剥夺/再灌注（OGD/R）大鼠脑微血管内皮细胞（BMECs）焦亡及血管新生的影响和可能作用机制。方法 BMECs体外培养，分别经OGD/R诱导、NLXTD含药血清处理及si RNA转染caspase-1，设置Control组：BMECs+10%空白血清；OGD/R组：BMECs+OGD/R+10%空白血清；NLXTD组：BMECs+OGD/R+10%NLXTD含药血清；si RNA-NC组：BMECs转染si RNA-NC+OGD/R+10%空白血清；si-caspase-1组：BMECs转染si-caspase-1+OGD/R+10%空白血清；si-caspase-1+NLXTD组：BMECs转染si-caspase-1+OGD/R+10%NLXTD含药血清。采用CCK-8法、Transwell小室实验、管腔形成实验分别检测细胞增殖、迁移、成管能力；试剂盒测定上清液中乳酸脱氢酶（LDH）活性；ELISA法检测培养液中炎性因子IL-1β、IL-18的含量；Western blot检测细胞焦亡相关蛋白pro-caspase-1、caspase-1、NLRP3、Gasdermin D及血管生成关键蛋白VEGF,VEGFR2的表达。结果 BMECs经OGD/R诱导后出现明显的损伤；与OGD/R组比较，10%的NLXTD含药血清能显著提高OGD/R损伤BMECs的存活率、迁移能力及成管能力（P<0.01），降低IL-1β、IL-18的含量以及LDH的释放（P<0.01）;Western blot实验结果显示，NLXTD含药血清可上调OGD/R损伤BMECs的VEGF和VEGFR2蛋白表达（P<0.01），并降低pro-caspase-1、caspase-1、NLRP3、Gasdermin D的蛋白表达（P<0.01），加入caspase-1 si RNA后，能进一步促进VEGFR2蛋白表达（P<0.01）。结论 NLXTD可以提高OGD/R损伤后的BMECs增殖、迁移、成管能力，促进血管新生，其机制可能与抑制细胞焦亡caspase-1/Gasdermin D通路，减轻BMECs损伤，上调VEGF、VEGFR2水平有关。

• 单位
  安徽中医药大学