蟾毒灵通过基质金属蛋白酶抑制人结肠癌细胞HCT116的侵袭和迁移

作者：董倩倩; 张俊萍^*

来源：中医研究, 2020, 33(03): 76-80.

• 蟾毒灵
• 结肠癌
• 侵袭
• 迁移
• 基质金属蛋白酶-2
• 基质金属蛋白酶抑制因子-2
• 实验研究

目的:研究蟾毒灵对人结肠癌细胞HCT116侵袭和迁移能力的作用并对其分子机制进行探讨。方法:将人结肠癌HCT116按对照组(野生型细胞)、蟾毒灵处理组(0.125,0.25,0.5,1,2μmol/L)和顺铂(DDP)组分组,采用CCK-8法检测蟾毒灵对人结肠癌细胞HCT116增殖的抑制作用,采用细胞侵袭小室法(Transwell)法检测蟾毒灵对HCT116细胞侵袭和迁移能力的影响,采用蛋白质免疫印迹法(Western-blot)检测经蟾毒灵处理HCT116细胞24h后基质金属蛋白酶-2(matrix metalloproteinases-2,MMP-2)和基质金属蛋白酶抑制因子-2(tissueinhibitorsof metalloproteinases-2,TIMP-2)的蛋白表达情况,采用实时荧光定量PCR(RT-PCR)检测蟾毒灵处理的HCT116中MMP-2、TIMP-2的mRNA表达情况。结果:①CCK-8实验结果显示,蟾毒灵(0.125,0.25,0.5,1,2μmol/L)能显著抑制结肠癌细胞HCT116的增殖(P<0.05),并呈时间和剂量依赖性。②Transwell实验结果表明,与对照组对比,蟾毒灵(0.25,0.5,1μmol/L)对结肠癌细胞HCT116的侵袭和迁移能力具有不同程度的抑制作用(P<0.01)。③Western-blot实验结果表明,与对照组对比,蟾毒灵能够明显下调MMP-2,上调TIMP-2蛋白的表达水平,并呈一定的量效关系(P<0.01)。④RT-PCR结果显示,与对照组对比,蟾毒灵能够显著下调MMP-2 mRNA,并上调TIMP-2mRNA的表达。结论:蟾毒灵能明显抑制结肠癌细胞HCT116的侵袭和迁移,其机制可能与上调TIMP-2的表达,下调MMP-2的表达水平有关。

• 单位
  周口市中心医院; 河南省中医药研究院