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摘要
目的：探讨麻芍平喘汤（MSPC）通过磷脂酰肌醇3-激酶（PI3K）/蛋白激酶B(Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶蛋白（mTOR）信号通路对脂多糖（LPS）诱导的人支气管气道上皮样细胞（16HBE）自噬的影响。方法：选用人支气管上皮细胞16HBE作为研究对象，采用细胞增殖与活性检测（CCK-8）法检测LPS诱导的16HBE活性影响和麻芍平喘含药血清对16HBE细胞活性影响；以CCK-8法筛选出的适宜条件的LPS诱导16HBE细胞，并测定肿瘤坏死因子-α(TNF-α)含量鉴定模型成立，制备麻芍平喘汤含药血清作用于LPS诱导的16HBE，将细胞分为正常组、LPS组、LPS+MSPC组、LY294002+LPS组、LY294002+LPS+MSPC组。透射电镜观察细胞的自噬囊泡和超微结构的变化；蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞PI3K、磷酸化PI3K(p-PI3K)、Akt、p-Akt、mTOR、p-mTOR及微管相关蛋白1轻链3B(LC3B)的蛋白表达水平；酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测5组炎症因子白细胞介素（IL）-5、IL-6、TNF-α、IL-10的表达水平。结果：LPS对16HBE细胞的抑制率呈剂量依赖性；与正常组比较，模型组作用24 h能显著升高促炎因子TNF-α表达（P<0.05）；麻芍平喘汤含药血清对16HBE的促进作用呈浓度依赖性；与正常组比较，模型组自噬体形成增多，麻芍平喘汤可以一定程度抑制自噬，改善细胞状态；Western blot结果显示，与正常组比较，LPS组p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白的表达明显降低（P<0.05）,LC3B蛋白的表达显著升高（P<0.01）；与LPS组比较，含药血清组p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,LC3B表达水平明显降低（P<0.05），与LPS+LY294002组比较，LY294002+LPS+MSCP组p-PI3K、p-Akt、p-mTOR蛋白表达水平明显升高（P<0.05）,LC3B明显降低（P<0.05）。ELISA结果显示，与正常组比较，LPS组细胞炎症IL-5、IL-6、TNF-α、IL-10水平显著升高（P<0.01），用药处理后，与LPS组比较，TNF-α、IL-6、IL-8含量均显著下降（P<0.01）,IL-10升高（P<0.01）。结论：麻芍平喘汤可能通过激活PI3K/Akt/mTOR信号通路减轻LPS诱导的人气道上皮细胞16HBE自噬的发生，改善炎症反应。
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