腹膜高级别黏液癌伴印戒细胞裸小鼠模型的建立及生物学功能鉴定

作者：林育林; 张珏; 杨智冉; 李鑫宝; 姬忠贺; 许洪斌; 闫风彩; 周全; 彭正; 李雁^*

来源：中华肿瘤杂志, 2019, 41(12): 923-931.

• 腹膜假黏液瘤
• 原位人源异种移植模型
• 肿瘤生物学
• 全外显子组测序
• KIT基因突变

目的建立腹膜假黏液瘤(PMP)原位人源异种移植(PDX)模型, 鉴定模型的生物学性状, 为系统研究PMP病理机制、发展治疗新策略提供实验平台。方法将术中获取的PMP肿瘤标本清洗切块后接种于BAL B/c-nu小鼠皮下, 进行6次传代稳定后, 第7次传代开腹种植于裸小鼠腹腔, 将皮下瘤和腹腔原位肿瘤混合匀浆化制成瘤细胞悬液, 按100 μl/只接种于10只BALB/c-nu小鼠, 建立PMP的PDX模型。测量裸小鼠体重变化、实验性腹膜癌指数(ePCI)评分判断腹腔肿瘤播散程度, 分析肿瘤病理学特点, 全外显子高通量测序鉴定模型的关键基因表达。结果模型制作成功率为100%(10/10), 接种后荷瘤动物体重平稳增加, 第27天起体重持续下降。解剖见肿瘤累及盆腹腔大多数脏器, 包括膈肌、肝、脾、胃、肾、壁腹膜、肠及肠系膜, 盆腹腔可见少量黏液性腹水, 中位ePCI为8分。常规组织病理学检查显示, 腹膜高级别黏液癌伴印戒细胞, 癌细胞异型性显著, 侵犯脏器实质。免疫组化染色显示, MUC1、MUC2、MUC5AC、CEA、CA199、CK20、CDX-2、Ki-67均阳性, MUC6、CK7、p53均阴性。全外显子组测序显示, 最主要的基因突变为KIT基因外显子10发生错义突变c.1621A>C, 突变丰度达89.7%。结论成功建立腹膜高级别黏液癌伴印戒细胞的PDX模型, 该模型具备恶性程度高、生长速度快、侵袭性较强的生物学特征。

• 单位
  北京大学; 解放军总医院; 首都医科大学附属北京世纪坛医院; 航天中心医院