摘要
目的:检测原代大鼠脊髓背角神经元双孔钾离子通道TRESK的变化对lncRNA表达谱的影响。方法:培养原代大鼠脊髓背角神经元,随机分为4组:空白组、谷氨酸(Glu)组、Glu+NC siRNA组、Glu+TRESK siRNA组。免疫印迹法和RT-PCR分别检测各组神经元TRESK蛋白和mRNA表达,基因芯片检测Glu+NC siRNA组和Glu+TRESK siRNA组lncRNA差异表达谱,并对差异表达的lncRNA进行生物信息分析,从而预测TRESK变化对脊髓神经元生物功能的影响。结果:与空白组相比,Glu组和Glu+NC siRNA组TRESK蛋白及mRNA表达均明显上调(P<0.05);与Glu+NC siRNA组相比,Glu+TRESK siRNA组脊髓神经元TRESK蛋白及mRNA表达均明显下调(P<0.05)。基因芯片结果显示,Glu+TRESK siRNA组脊髓神经元lncRNA表达谱发生显著变化,其中212个基因表达上升,110个基因表达下降。GO分析差异表达的lncRNA主要参与炎症反应和神经元凋亡等生物功能过程,KEGG通路富集分析显示涉及mTOR信号通路、蛋白激酶信号通路和GRCP信号通路富集度最高。结论:谷氨酸诱导神经元TRESK中相关lncRNA表达谱发生差异,从而引起细胞炎症反应和神经元凋亡,其中mTOR信号通路、蛋白激酶信号通路和GRCP信号通路可能是主要的靶点通路。
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