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摘要
本研究以分离自玉溪烤烟叶面的产淀粉酶菌株的基因组DNA为模板,设计特异性引物,通过PCR技术扩增出淀粉酶基因。将目的基因片断与表达载体质粒p ET30a连接,得到重组质粒而后转化到E.coli BL21(DE3),经菌落PCR检测阳性克隆。通过获得重组克隆菌株BL21-p ET,经IPTG诱导表达,SDS-PAGE检测目的蛋白在大肠杆菌中高效表达及获得具有催化活性的重组淀粉酶。
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单位昆明医科大学海源学院; 云南中烟工业有限责任公司; 昆明理工大学
