摘要
目的 观察通过两种不同途径制备的中药复方“肝纤方”含药血清对大鼠肝星状细胞(HSC)在各个水平上的作用 ,以明确其抗肝纤维化的分子学机制和研究有关中药抗肝纤维化的血清药理学实验方法。方法 采用血清药理学方法制备两种含药血清 门静脉血清和外周静脉 (体静脉 )血清 ,作用于离体培养的大鼠传 2代HSC ,以氚标胸腺嘧啶 ([3 H]TdR)和氚标脯氨酸 ([3 H ]Pro)核素掺入试验、流式细胞仪、逆转录 聚合酶链反应 (RT PCR)等方法检测HSC增殖及其胶原合成量、细胞增殖周期、Ⅰ型前胶原mRNA表达水平等指标。结果 门静脉血清组 [3 H ]TdR和 [3 H]Pro的掺入量分别为 (5 69.2± 19.8)cpm/孔和(90 7.3± 10 .3 )cpm /孔 ,与对照组相比均减少(P <0 .0 5 ) ,外周静脉血清组的为 (5 92 .8± 10 .9)cpm/孔和 10 2 5 .2± 5 4.0cpm/孔 ,与对照组相比前者减少 (P <0 .0 5 )而后者差异无显著性 ;门静脉含药血清提高HSC的G0 /G1期的比例和降低G2 /M及S期的比例 (P <0 .0 5 ) ,而外周静脉血清对各细胞周期无影响 (P >0 .0 5 ) ;I型前胶原mRNA的PC mRNA/GAPDH mRNA比值为门静脉血清组 0 .42± 0 .0 9和外周静脉血清组 0 .72± 0 .0 5 ,与对照组相比均降低 ,而门静脉血清组则更低 (P <0 .0 5 )。结论 肝纤方抗肝纤维化的?
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单位中山大学中山医学院; 中山大学; 中山大学附属第三医院