褪黑素对H9c2心肌细胞缺氧/复氧损伤的保护作用及其机制

作者：杨吉平; 费琳; 钟钰西; 余蕾; 苟兴春^*

来源：山西医科大学学报, 2020, 51(08): 761-765.

DOI：10.13753/j.issn.1007-6611.2020.08.005

• 褪黑素
• H9c2心肌细胞
• 缺氧/复氧损伤
• 受体相互作用蛋白激酶3
• 钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶Ⅱ

目的研究褪黑素(MLT)对H9c2心肌细胞缺氧/复氧(H/R)损伤的保护作用,并探讨其机制。方法将H9c2心肌细胞随机分为对照组、H/R组、MLT组和受体相互作用蛋白激酶3抑制剂(GSK-872)组。对照组用不含药物的DMEM处理,H/R组对H9c2细胞进行缺氧4 h/复氧6 h处理,MLT组和GSK-872组细胞在H/R前2 h分别给予100μmol/L MLT和5μmol/L GSK-872预处理。采用CCK-8法检测细胞活力,试剂盒测定培养液中乳酸脱氢酶(LDH)的活性,碘化丙啶(PI)染色观察细胞坏死情况,Western blot检测RIPK3和磷酸化钙离子/钙调蛋白依赖蛋白激酶(p-CaM K)Ⅱ的表达。结果与对照组比较,H/R组细胞存活率显著下降(P <0.01),培养液中LDH含量明显升高(P <0.01),坏死细胞数量显著增多(P <0.01),RIPK3和p-CaMKⅡ蛋白表达水平显著升高(P <0.01)。与H/R组比较,MLT组和GSK-872组细胞存活率明显提高(P <0.01),LDH含量显著降低(P <0.01),坏死细胞明显减少(P <0.01),RIPK3和p-CaMKⅡ蛋白的表达明显下调(P <0.01)。而MLT组与GSK-872组上述指标比较差异均无统计学意义(P> 0.05)。结论褪黑素可减轻H9c2心肌细胞的H/R损伤,其机制可能与抑制RIPK3/CaMKⅡ信号通路有关。

• 单位
  西安交通大学第一附属医院; 西安医学院