hADRB3重组腺病毒的构建及经心包注射后hADRB3在CHF大鼠体内的表达

作者：宋衍秋; 耿华; 刘珊; 薛向阳; 毛用敏; 徐美林; 秦勤; 丛洪良

来源：重庆医学, 2019, 48(17): 2918-2922.

• β3-肾上腺素受体
• 腺病毒
• 慢性心力衰竭
• 病毒包装
• 心包注射

目的构建携带人β3-肾上腺素受体基因(hADRB3)的高滴度纯化重组腺病毒Ad-hADRB3,并观察经心包注射后hADRB3在慢性心力衰竭(CHF)大鼠体内的表达。方法 HindⅢ、SalⅠ双酶切hADRB3cDNA质粒获得hADRB3目的基因片段,应用AdEasy-1腺病毒载体系统构建Ad-hADRB3,测定纯化后的病毒滴度。将CHF成模大鼠10只随机分为两组,观察组单次心包注射2.50×1011 VP/mL NS Ad-hADRB3 100μL,对照组予以心包注射0.90%NaCl 100μL,7d后免疫组织化学(IHC)检测hADRB3在CHF大鼠体内的表达情况。结果成功构建重组腺病毒Ad-hADRB3,纯化后滴度达到5.20×1012 VP/mL。单次心包注射AdhADRB3,CHF大鼠心、肝、肺、肾、脾及小肠均检测到hADRB3的表达。结论腺病毒介导的外源hADRB3基因经心包注射后,可在CHF大鼠多脏器中表达。

• 单位
  天津市胸科医院