摘要
为了探讨温胆汤含药血清对代谢相关脂肪性肝病(MAFLD)细胞模型药物干预的作用及可能的分子机制,将C57BL/6J雄性小鼠随机分为正常对照组和温胆汤含药血清组,实验第14 w处死小鼠,采取下腔静脉取血的方式,收集全血,制备含药血清.利用MTT方法检测不同浓度的温胆汤含药血清对于HepG2细胞活力的影响.利用游离脂肪酸建立MAFLD HepG2细胞模型,细胞模型分为6组:正常对照组(简称空白组)、细胞模型组(简称模型组)温胆汤含药血清低剂量组(简称低剂量组)、温胆汤含药血清中剂量组(简称中剂量组)、温胆汤含药血清高剂量组(简称高剂量组)、吡咯列酮治疗组(简称吡咯列酮组).比较6组细胞甘油三酯含量,检测各组细胞的炎症反应水平、氧化损伤指标丙二醛(MDA)、超氧化物歧化酶(SOD)水平、脂质代谢重要基因、蛋白SREBP-1c、FAS、DGAT-2、SCD-1和ACO表达水平.MTT检测的结果表明,5、10、20、和50 mg/L的温胆汤含药血清对于HepG2细胞活力不会产生明显的抑制作用,但是,100 mg/L的温胆汤含药血清会产生明显的细胞毒性.模型组细胞与空白组细胞比较,细胞中形成大量脂滴,甘油三酯含量明显升高,证实了游离脂肪酸成功构建了MAFLD细胞模型;各药物干预治疗组细胞脂肪水平,甘油三酯含量、炎症反应水平、脂质过氧化水平、和脂质代谢重要基因和蛋白表达均较模型组细胞显著降低,高剂量组和吡咯列酮组降低最为显著,差异有统计学意义(P<0.05).本研究表明不同剂量温胆汤含药血清均能明显改善MAFLD细胞模型中脂质沉积,降低甘油三酯含量和炎症反应水平,可能与调节脂质代谢、降低细胞中脂质过氧化水平和脂质代谢重要基因的表达有关.
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单位天津中医药大学第一附属医院; 天津市中医药研究院附属医院