摘要
目的观察chr14∶101402109-101464448C在胰腺癌组织、血清中的表达, 分析其与患者临床病理特征间的相关性, 观察其对胰腺癌细胞增殖和侵袭的影响。方法实时定量反转录聚合酶链反应(RT-qPCR)法检测60例胰腺癌组织及血清中chr14∶101402109-101464448C表达, LSD-t检验分析其表达差异, χ2检验分析其与患者临床病理因素间的相关性。计算chr14∶101402109-101464448C诊断胰腺癌的敏感性、特异性和准确率。受试者工作特征(ROC)曲线分析其作为胰腺癌诊断分子标志物的效能。RT-qPCR法检测胰腺癌细胞株(BxPC-3、Capan-1、PANC-1、AsPC-1、HPAC)与正常胰腺导管上皮细胞株HPDE中chr14∶101402109-101464448C的表达, 单因素方差分析其表达差异, 分别构建chr14∶101402109-101464448C过表达组、对照组(pEX-NC组)的PANC-1细胞株及敲减组、对照组(si-NC组)的BxPC-3细胞株, RT-qPCR检测转染情况;噻唑蓝(MTT)法、平板克隆实验检测各细胞增殖及克隆形成;细胞划痕实验和Transwell实验检测细胞迁移侵袭能力, 采用LSD-t检验或秩和检验进行统计分析。结果 chr14∶101402109-101464448C在胰腺癌组织及血清中表达水平分别高于癌旁正常组织及健康者血清(12.88±0.29比1.01±0.20, 9.79±0.11比0.99±0.11), 差异有统计学意义(t组织=27.38, t血清=64.84, 均P<0.05), 其表达与患者年龄、性别、病理学类型、肿瘤部位无明显相关(χ年龄2=0.221, χ性别2=0.009, χ病理类型2=0.044, χ肿瘤部位2=0.192, 均P>0.05), 但与肿瘤大小、CA19-9水平、肿瘤分化程度、TNM分期及淋巴结转移显著相关(χ肿瘤大小2=4.706, χCA19-92=9.706, χ分化程度2=6.899, χ淋巴结转移2=4.252, 均P<0.05)。chr14∶101402109-101464448C检测胰腺癌的敏感度、特异性和准确率分别为78.3%(47/60)、70.0%(42/60)及81.7%(49/60), 均高于CA19-9(均P<0.05), 其作为诊断胰腺癌分子生物标志物的ROC曲线下面积为0.939[95%可信区间(CI):0.893~0.985, P<0.01]。各胰腺癌细胞株中chr14∶101402109-101464448C表达水平均明显高于HPDE细胞株(5.97±0.12、5.77±0.20、5.08±0.14、5.71±0.09、5.70±0.10比1.00±0.06, FBxPC-3=3.009, FCapan-1=7.786, FPANC-1=4.115, FAsPC-1=1.072, FHPAC=2.566, 均P<0.05)。成功构建过表达的PANC-1细胞株(pEX-chr14∶101402109-101464448C)及敲减表达的BxPC-3细胞株(si-chr14∶101402109-101464448C), 前者的细胞增殖、克隆、侵袭及迁移能力均显著高于pEX-NC组(均P<0.05), 而后者却较si-NC组均显著降低(均P<0.05)。结论 chr14∶101402109-101464448C在胰腺癌中高表达, 且与患者临床病理特征相关, 沉默chr14∶101402109-101464448C可抑制胰腺癌细胞增殖及侵袭转移。
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单位郑州大学; 河南科技大学第一附属医院