猪δ冠状病毒实时荧光RT-PCR检测方法的建立与应用

作者：苑建军; 杨德全; 鞠厚斌; 庄建萍; 葛菲菲; 杨显超; 李鑫; 沈海潇

来源：中国动物检疫, 2022, 39(11): 115-120.

• 猪δ冠状病毒
• 实时荧光RT-PCR
• 快速检测
• 应用

为灵敏、快速检测猪δ冠状病毒(porcine deltacoronavirus,PDCoV),根据PDCoVM基因保守区域设计引物和探针,建立了一种PDCoV实时荧光RT-PCR检测方法,并评价了该方法的特异性、灵敏性和重复性。结果显示,该方法的拷贝数对数值与Ct值在1.3×103～1.3×107 copies/μL拷贝数浓度范围内呈现良好的线性关系,R2=0.994;最低检出限为13 copies/μL,且无非特异性扩增;批内和批间重复性试验变异系数(CV)为0.24%～2.15%,均小于3%。利用该方法和普通RT-PCR对42份临床样品同时进行检测,发现本方法比普通RT-PCR灵敏性更高,二者符合率为95.2%。以上结果表明,本试验建立的实时荧光RT-PCR方法灵敏、特异、可靠,可用于PDCoV的临床检测和流行病学调查。

• 单位
  上海市动物疫病预防控制中心