摘要
目的 观察固脾消积饮对人肝星状细胞LX-2共培养条件下肝癌细胞HepG2氨基酸代谢和能量代谢的影响。方法 建立HepG2细胞和LX-2细胞共培养体系,与单独培养的HepG2细胞同时设置对照组、空白血清组、中药血清组和阳性药组,干预24 h后,CCK8法检测细胞增殖活力;DAPI染色观察凋亡;ELISA检测细胞上清液三酰甘油(TG)、总胆固醇(TC)、丙酮酸和葡萄糖含量,试剂盒检测细胞丙二醛(MDA)含量和糖酵解速率,高效液相色谱检测细胞上清液氨基酸含量,Western blot检测腺苷酸活化蛋白激酶(AMPKα)表达。结果 与同一培养体系对照组比较,10%、20%中药血清组及阳性药组单独培养和共培养HepG2细胞增殖活力降低,上清液TG、TC、葡萄糖含量减少,丙酮酸含量增加,细胞糖酵解速率降低,MDA含量增加,17种氨基酸含量减少,差异均有统计学意义(P<0.05,P<0.01)。Western blot结果显示,10%中药血清能升高单独培养和共培养HepG2细胞p-AMPKα/AMPKα比值。结论 固脾消积饮能调节肝星状细胞共培养条件下HepG2细胞氨基酸代谢和能量代谢,其机制与激活p-AMPKα通路有关。
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单位湖南中医药大学; 湖南省中医药研究院附属医院