高灵敏度磁荧光免疫层析试纸模式构建及在呕吐毒素检测中的应用

作者：孙亚宁; 杨苏珍; 杨继飞; 胡骁飞; 陈鑫鑫; 张颖硕; 邓瑞广; 张改平

来源：食品科学, 2021, 1-15.

• 磁荧光纳米颗粒
• 免疫学检测
• 呕吐毒素
• 试纸

构建基于磁荧光纳米材料的免疫层析试纸模式，弥补现在免疫层析技术的不足，为更灵敏的免疫学快速检测提供技术支撑。本试验以呕吐毒素（DON）为靶标，采用溶剂热法制备羧基修饰的超顺磁颗粒，碳二亚胺法将磁颗粒、绿色荧光蛋白及DON单克隆抗体进行偶联，一步法制备磁荧光抗体探针，以DON-BSA为检测线建立磁荧光免疫层析试纸。同时用胶体金标记DON单克隆抗体，以DON-BSA为检测线建立胶体金免疫层析试纸；制备的磁荧光抗体探针具有很好的磁性、荧光特性及抗体反应性，基于该探针成功制备了DON磁荧光免疫层析试纸，该试纸回归方程为y = -0.562x+0.921，R2=0.990，IC50为5.611 ng/mL，检测限为1.089 ng/mL；制备了DON胶体金免疫层析试纸，该试纸裸眼检测灵敏度为500 ng/mL；定量检测回归方程为y = -0.543x+1.485，R2=0.991，IC50为65.16 ng/mL，检测限为11.94 ng/mL。DON磁荧光免疫层析试纸的灵敏度比胶体金免疫层析试纸提高了11.6倍。本试验建立的磁荧光免疫层析试纸模式可以同时实现样品的富集及荧光信号检测，提高检测灵敏度，并成功用于DON的检测，为磁荧光纳米颗粒广泛应用于免疫层析领域打下基础。

• 单位
  河南农业大学; 河南省农业科学院