虎源伪狂犬病毒的鉴定及gB基因分析

作者:李元果; 高晓龙; 桑晓宇; 王海军; 张成林; 王爱荣; 于志君; 任志广; 郑学星; 冯娜; 王铁成; 杨松涛; 黄耕; 高玉伟; 夏咸柱; 胡永浩
来源:中国病原生物学杂志, 2014, 9(12): 1057-1060.
DOI:10.13350/j.cjpb.141201

摘要

目的对不明原因死亡虎进行病毒感染检测,并对病毒部分保守基因序列进行分析。方法采集不明原因病死虎肺组织,研磨后提取总DNA,使用特异性引物对伪狂犬病毒gB基因、gD基因进行PCR扩增、测序并构建进化树;经负染法染色后用电子显微镜观察病毒形态结构;取研磨组织液接种家兔,观察病毒的致病力。结果 PCR扩增组织样品为gB基因、gD基因阳性,基因序列经blast比对伪狂犬病毒。将gB基因通过序列测定分析并与GenBank中近4年公布的9株伪狂犬病毒gB基因比对,同源性为99.5%100%。进化树分析该病毒与2012年北京家猪分离株属同一进化分支。组织研磨液置电镜观察,见病毒呈圆形,直径100nm左右,有囊膜,为具有典型特征的疱疹病毒样病毒粒子。家兔接种组织研磨液后出现啃咬接种部位,抽搐,嘶叫等伪狂犬病症状。结论本研究在病死虎体内检测到伪狂犬病毒,表明濒危野生动物虎已受到伪狂犬病毒病的威胁。

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