基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统构建ε–聚赖氨酸合成酶的链霉菌稳定表达载体

作者：周奕阳; 李鹏; 谭之磊; 邓子新; 贾士儒; 欧竑宇^*

来源：湖南农业大学学报(自然科学版), 2019, 45(02): 149-153.

DOI：10.13331/j.cnki.jhau.2019.02.007

• 链霉菌
• 表达载体
• Ⅱ型毒素–抗毒素系统
• ε–聚赖氨酸合成酶
• 质粒稳定性

鉴于ε–聚赖氨酸収酵过程对抗生素压力条件的依赖,尝试基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)构建无选择压力下稳定表达ε–聚赖氨酸的淀粉酶产色链霉菌表达系统:将抗毒素基因relB2sca与ε–聚赖氨酸合成酶基因pls克隆至表达载体,幵导入淀粉酶产色链霉菌pls缺失突变株,将毒素基因relE2sca整合至淀粉酶产色链霉菌的染色体(突变株YY3),获得包含ε–聚赖氨酸稳定表达的突变株YY1。经过多次传代,相比对照组,在不含抗生素压力条件下,突变株YY1依然能够稳定地合成ε–聚赖氨酸。毒素蛋白RelE2sca的表达会导致变铅青链霉菌、阿维链霉菌和链霉菌FR–008等常用链霉菌异源表达宿主的死亡,提示基于Ⅱ型毒素–抗毒素系统(relBE2sca)可作为一种通用的遗传标记。

• 单位
  上海交通大学; 生命科学技术学院; 生物工程学院; 天津科技大学; 江西省科学院微生物研究所