摘要
目的利用大肠杆菌重组表达金黄色葡萄球菌(SAU)糖肽水解酶LytM及其C端185~316 aa蛋白(LytM185~316),检测其生物学活性,并制备多克隆抗体,为检测LytM活性体的天然形式和产生机制以及研究LytM蛋白在SAU感染中的生物学意义奠定基础。方法以SAU 8325-4基因组为模板,PCR扩增lytM及其C端基因,并将其克隆入pET-28a构建重组表达载体,转化入大肠杆菌BL21(DE3),利用IPTG诱导阳性克隆表达目的蛋白,通过亲和纯化获得目的蛋白LytM及LytM185~316,并制备LytM的多克隆抗体;用薄层层析法测定LytM以及LytM185~316的生物活性,并检测...
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单位军事医学科学院基础医学研究所