人血小板衍生生长因子B链基因酵母表达载体的构建

作者：杨春露; 陈建庭; 邓凡; 唐焕章; 谭小云; 罗深秋

来源：第一军医大学学报, 2004, (03): 273-276.

DOI：10.3321/j.issn:1673-4254.2004.03.008

• 血小板源生长因子
• 遗传载体/化学合成
• RT-PCR
• 酵母 platelet-derived growth factor
• genetic vectors/chemical synthesis
• reverse transcriptional polymerase chain reaction
• yeasts

目的构建带信号肽和不带信号肽的人血小板衍生生长因子B(PDGF-B)链基因酵母表达载体,探讨该基因在酵母中的表达效率和活性。方法利用逆转录-聚合酶链反应(RT-PCR)从人血管内皮细胞总RNA中扩增出PDGF-B的cDNA,克隆入pGEM-T载体,进行序列测定。进而克隆至酵母表达质粒pMETB和pMETαA并进行重组子双酶切鉴定。结果扩增获得了含信号肽(578 bp)和不含信号肽(340 bp)的编码PDGF-B链基因;构建了PDGF-B的酵母表达载体pMETB-PDGFB1,pMETαA-PDGFB2。测序结果显示,重组载体中目的基因序列与GENE BANK公布的序列一致。结论人血小板衍生生...

• 单位
  第一军医大学南方医院; 南方医科大学