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摘要
为进一步利用ISSR分子标记进行铁线莲遗传多样性分析、种质资源鉴定、遗传图谱构建等研究,本试验以卷萼铁线莲DNA为模板,采取L9(34)正交试验设计,对影响扩增反应的模板DNA含量、目标引物浓度、Master Mix、循环数4个主要因素进行优化,从而得出适宜于铁线莲的ISSR-PCR反应体系。并利用筛选出的12条多态性高的引物构建了16种野生铁线莲的指纹图谱。结果表明,在25μL反应体系中,各因素的最佳配比为模板DNA用量40 ng,引物浓度6μmol/L,Master Mix用量14μL,循环数40个。并且利用最优体系构建了16种野生铁线莲的遗传指纹图谱。该体系的建立为ISSR技术在铁线莲遗传多样性研究、遗传指纹图谱构建、分子标记辅助育种等研究提供了理论基础。指纹图谱的构建可以有效的对16种野生铁线莲进行区分和鉴定。
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