养阴活血方干预ApoE-/-动脉粥样硬化小鼠DNA甲基化酶的研究

作者：缪蓉; 周李煜; 白丹丹; 杨云君; 陈艳冉; 姜林宏; 袁冬平; 龙军^*; 吉娟

来源：南京中医药大学学报(自然科学版), 2023, 39(06): 523-531.

DOI：10.14148/j.issn.1672-0482.2023.0523

• 养阴活血方
• 动脉粥样硬化
• -/-小鼠" name="keyword">ApoE-/-小鼠
• 斑块
• 血脂
• DNA甲基化

目的 从DNA甲基化角度观察养阴活血方及其功效单元干预动脉粥样硬化(Atherosclerosis, AS)进程。方法 ApoE-/-小鼠随机分为对照组、模型组、辛伐他汀组、养阴活血方组、养阴组、清热组和活血组。对照组小鼠给予普通饲料喂养，其余组小鼠均给予高脂饲料喂养。分别于第10、12、14、16、18周，对照组小鼠注射等体积无菌PBS,其余组腹腔注射10μg的LPS。灌胃给药与高脂饲料喂养同时进行，第20周检测。油红O染色观测小鼠主动脉斑块面积；生化试剂盒检测小鼠TC、TG、LDL-C、HDL-C、non-HDL-C水平；HE冠脉染色观测小鼠冠脉管腔狭窄情况和管腔面积；qPCR检测小鼠脾脏/主动脉DNA甲基化酶Tet1、Tet2、Tet3、Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b mRNA表达；Western blot检测小鼠脾脏/主动脉DNA甲基化酶Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白表达；ELISA检测细胞因子IL-6、IL-2、TGF-β1的变化。结果 与模型组相比，养阴活血方组能显著减少斑块面积并抑制冠脉狭窄(P<0.01),降低TG、LDL-C水平(P<0.01),升高HDL-C水平(P<0.05),降低脾脏Dnmt1和Dnmt3a蛋白表达(P<0.05),降低主动脉Dnmt1 mRNA、Dnmt3b mRNA(P<0.05,P<0.001)和主动脉Dnmt1、Dnmt3b蛋白表达(P<0.05),下调血清IL-6水平(P<0.05),上调TGF-β1水平(P<0.05)。与模型组比较，各功效单元组均不同程度减少斑块面积、调节血脂水平；养阴组降低脾脏Dnmt3b mRNA表达(P<0.05),降低主动脉Dnmt3b mRNA(P<0.001)和Dnmt3a蛋白(P<0.05)表达，升高TGF-β1水平(P<0.05);清热组降低脾脏Dnmt1蛋白表达(P<0.05),主动脉Dnmt1和Dnmt3b mRNA(P<0.05)和Dnmt1、Dnmt3a、Dnmt3b蛋白表达(P<0.05),降低IL-6水平(P<0.05),增加TGF-β1水平(P<0.05);活血组降低主动脉Dnmt3a和Dnmt3b蛋白表达(P<0.05),降低IL-6水平(P<0.05)。结论 养阴活血方通过调节血脂，降低DNA甲基化酶Dnmts的表达，改善炎症水平，从而有效减少高脂联合LPS注射诱发的ApoE-/-小鼠AS斑块的形成。

• 单位
  中国医学科学院皮肤病研究所; 中国医学科学院皮肤病医院; 南京中医药大学