维罗非尼联合E3330对BRAF~(V600E)突变甲状腺癌乳头状癌细胞系NIS水平影响

作者：孙蓓^*; 胡琳斐; 王会娟; 郑向前

来源：中华肿瘤防治杂志, 2019, 26(15): 1084-1089.

DOI：10.16073/j.cnki.cjcpt.2019.15.005

• BRAF突变
• 氧化还原因子-1
• 甲状腺癌
• 钠碘转运体

目的放射性碘(radioactive iodine,RAI)是分化型甲状腺癌的主要治疗方法,然而许多患者会发生RAI耐药,可能与甲状腺癌钠碘转运体(sodium iodide symporter,NIS)的缺失或表达减少所引起的RAI摄入减少密切相关。本研究旨在探讨vemurafenib联合氧化还原因子-1(redox factor-1,Ref-1)抑制剂E3330对BRAFV600E突变型甲状腺乳头状癌细胞系NIS水平的影响,为临床放射性碘的有效治疗提供条件。方法选取2014-01-01-2015-01-31天津医科大学肿瘤医院收治的124例甲状腺乳头状癌患者的肿瘤组织标本及其中8例患者正常组织。采用免疫组织化学染色法检测甲状腺乳头状癌和正常组织中Ref-1表达,同时对Ref-1表达情况进行评分并分析其与临床病理资料的关系;采用RT-qPCR、蛋白质印记法检测不同甲状腺乳头状癌细胞系中Ref-1表达水平;分别设置二甲基亚砜对照组(Ctrl组)、维罗非尼组(10μmol/L)、E3330组(50μmol/L)、联合组(10μmol/L维罗非尼+50μmol/L E3330),采用流式细胞学检测不同组别ROS含量变化及对分化指标NIS表达水平的影响。结果 BRAF突变(χ2=10.289,P=0.001)、有淋巴结转移(χ2=12.811,P<0.001)及TNMⅢ～Ⅳ期(χ2=4.216,P=0.04)与Ref-1的高表达呈正相关,Ref-1在甲状腺乳头状癌组织中mRNA表达(χ2=3.265,P=0.005 6)高于正常组织,且在BRAF突变细胞系BCPAP中的蛋白表达高于其他细胞系及甲状腺正常细胞系。维罗非尼与E3330联用处理细胞后ROS水平出现降低(t=3.994,P=0.016 2),同时分化指标NIS mRNA(tv=4.626,Pv=0.009 8;tc=9.694,Pc=0.000 6)及蛋白水平(tv=3.333,Pv=0.029;tc=6.007,Pc=0.003 9)较对照组出现升高,且联合组NIS mRNA(t=2.836,P=0.047 1)、蛋白水平(t=2.808,P=0.048 4)的升高程度较维罗非尼组更高。NAC处理BCPAP细胞8h清除ROS影响后,NIS mRNA(t=9.931,P=0.000 6)和蛋白水平(t=5.388,P=0.005 7)均出现升高,其差异有统计学意义。结论维罗非尼联合抑制剂E3330可进一步提高其对甲状腺乳头状癌细胞系NIS表达的促进作用,为甲状腺癌提供放射性碘治疗提供有效增敏剂。

• 单位
  天津医科大学