对氧磷酶2对氧化低密度脂蛋白诱导的乳鼠心肌细胞损伤的影响

作者：霍金秀; 马彦卓; 王冬梅; 唐丽娜; 啜玉彩; 昝晓花; 陈瑜

来源：第三军医大学学报, 2018, 40(02): 130-135.

DOI：10.16016/j.1000-5404.201708079

• 对氧磷酶2
• 氧化低密度脂蛋白
• 内质网应激
• 氧化应激
• 凋亡

目的探讨对氧磷酶2(paraoxonase 2,PON2)在氧化低密度脂蛋白(oxidized low density lipoprotein,ox-LDL)诱导的乳鼠心肌细胞(neonatal rat ventricular cells,NRVCs)损伤中的作用及机制。方法分离SD大鼠(出生13 d,雌雄不限,共90只)心肌细胞。细胞分为:(1)对照组(未进行任何干预)、(2)0.1μmol/Lox-LDL组(ox-LDL干预24 h)、(3)10μmol/Lsalubrinal+ox-LDL组(salubrinal预处理1h后加入ox-LDL干预24 h)、(4)20μg/mLPON2+ox-LDL组(PON2预处理1 h后加入ox-LDL干预24 h)、(5)2.5μmol/LMn(Ⅲ)TBAP+ox-LDL组[(Mn(Ⅲ)TBAP预处理1 h后加入ox-LDL干预24 h]。通过MTT法和Caspase-3/7活性检测试剂盒分别检测细胞活性和细胞凋亡变化(n=6);Western blot检测心肌细胞内质网应激和氧化应激蛋白表达情况(n=4)。结果与对照组相比,ox-LDL明显降低心肌细胞活性[(0.417±0.047)vs(0.883±0.064),P<0.01]显著增加心肌细胞凋亡[(11 505±817)vs(6417±439),P<0.01]。与ox-LDL组相比,PON2、salubrinal和Mn(Ⅲ)TBAP干预后,细胞活性显著升高[(0.567±0.066)、0.649±0.082)、0.539±0.049)vs 0.417±0.047),P<0.01],细胞凋亡显著下降[(7 776±488)、(7 545±547)、(7 960±480)vs(11 505±817),P<0.01)。与对照组相比,ox-LDL显著增加PON2蛋白表达[(0.86±0.223)vs(0.561±0.13),P<0.05]、内质网应激蛋白eIF-2αphox、caspase-12和氧化应激蛋白Nox2/gp91phox、p47phox表达[(1.309±0.274)vs(0.780±0.186)、(1.294±0.273)vs(0.606±0.064)、(1.342±0.274)vs(0.788±0.137)、(1.178±0.194)vs(0.629±0.125),P<0.01]。与ox-LDL组相比,PON2干预后,PON2蛋白表达明显升高[(1.190±0.151)vs(0.860±0.222),P<0.05];eIF-2αphox、caspase-12、Nox2/gp91phox和p47phox蛋白表达明显降低[(0.924±0.170)vs(1.309±0.274)、(0.895±0.202)vs(1.294±0.273)、(0.957±0.190)vs(1.342±0.274)、(0.799±0.232)vs(1.178±0.194),P<0.05]。与PON2作用类似,salubrinal干预后,eIF-2αphox和caspase-12蛋白表达明显降低[(1.010±0.096)vs(1.309±0.274)、(0.788±0.042)vs(1.294±0.273),P<0.01],Mn(Ⅲ)TBAP干预后,Nox2/gp91phox和p47phox蛋白表达明显降低[(0.898±0.190)vs(1.342±0.274)、(0.769±0.158)vs(1.178±0.194),P<0.01],二者均显著升高PON2蛋白表达[(1.248±0.259)、(1.176±0.248)vs(0.860±0.222),P<0.05]。结论 PON2可能通过代偿性升高抑制氧化应激和内质网应激而减轻ox-LDL诱导的心肌细胞损伤。

• 单位
  白求恩国际和平医院; 河北北方学院