VASN核酸适配体与端粒酶逆转录酶脱氧核酶偶联物的生物学功能研究

作者：马斐越; 李慧; 刘雪梅; 台福敏; 邵宁生; 高波^*; 郑晓飞^*

来源：生物化学与生物物理进展, 2023, 50(09): 2175-2184.

DOI：10.16476/j.pibb.2023.0263

• VASN蛋白
• 适配体
• 端粒酶逆转录酶
• 脱氧核酶
• 肝癌

目的 研究肝癌细胞特异性膜蛋白VASN (vasorin)的核酸适配体V4-2与靶向端粒酶逆转录酶（human telomerase reverse transcriptase,hTERT）的脱氧核酶（DNAzyme,Dz）偶联形成的偶联物V4-2-Dz在体外和肝癌细胞内的靶RNA切割活性，为脱氧核酶递送提供新策略。方法 Mfold网站预测V4-2-Dz的二级结构，通过体外切割实验检测V4-2-Dz的切割活性，通过流式细胞术和激光共聚焦实验检测V4-2-Dz和肝癌细胞HepG2结合的能力，利用RT-qPCR和MTT法分析V4-2-Dz作用于HepG2细胞对h TERT mRNA表达水平和细胞增殖的影响。结果 体外切割实验表明，V4-2-Dz具有切割hTERT RNA活性；流式细胞术和激光共聚焦实验结果显示，V4-2-Dz可以特异结合并进入HepG2细胞，V4-2-Dz可显著降低HepG2细胞中hTERT mRNA水平并抑制细胞增殖。结论 VASN蛋白的核酸适配体与端粒酶逆转录酶的脱氧核酶偶联物V4-2-Dz具有靶向肝癌细胞递送和切割活性，基于适配体和脱氧核酶的偶联物为肿瘤药物研究提供新的思路。