UAS-Hey转基因果蝇品系的构建与鉴定

作者：刘松年; 荆凌华; 伍星; 赵鑫

来源：重庆医学, 2018, 47(05): 654-659.

• Hey基因
• 转基因果蝇
• 显微注射
• 心血管发育

目的构建UAS-Hey转基因果蝇品系,为研究Hey基因在果蝇发育中的功能提供工具。方法利用逆转录PCR技术扩增果蝇Hey基因的编码序列,并亚克隆至pUAST表达载体,构建pUAS-Hey重组质粒。显微注射至野生型果蝇的胚胎,通过mini-white标记筛选出UAS-Hey转基因红眼果蝇。将这些转基因品系分别进行平衡与定位,并用PCR扩增方法鉴定。结果成功构建了pUAS-Hey重组质粒,通过显微注射及转基因果蝇的筛选与平衡,共获得7个独立的转基因品系。PCR分析证实P[mini-white,UAS-Hey]已整合入各转基因品系的基因组,且处于可表达的区域。结论成功构建了UAS-Hey转基因果蝇,为运用GAL4/UAS系统进一步研究Hey基因的功能与调控奠定了基础。

• 单位
  河南科技大学第一附属医院; 河南科技大学