脑心通调控NLRP3/Caspase-1通路抑制脂多糖诱导的BV2细胞焦亡

作者：王栋; 苏晓慧; 戚明珠; 王艳秋; 孔祥英^*; 林娜^*

来源：中国实验方剂学杂志, 2020, 26(10): 29-34.

DOI：10.13422/j.cnki.syfjx.20201037

• 脑心通
• 小胶质细胞
• 脂多糖
• 焦亡
• 炎症小体
• 补阳还五汤

目的:探索脑心通醇提物对脂多糖(LPS)诱导的小胶质细胞BV2焦亡的影响,并通过NOD样受体热蛋白结构域3(NLRP3)/半胱氨酸蛋白酶-1(Caspase-1)通路阐释其可能的作用机制。方法:LPS(1 mg·L-1)体外诱导BV2细胞的同时,加入不同质量浓度脑心通醇提物(2,10,50 mg·L-1)干预后,分别采用MTS法检测细胞活性,实时荧光定量PCR(Real-time PCR)检测白细胞介素-1β(IL-1β),肿瘤坏死因子-α(TNF-α)和NLRP3的mRNA水平;免疫荧光法检测NLRP3蛋白表达的情况;蛋白免疫印迹法(Western blot)检测NLRP3/Caspase-1通路关键蛋白表达。结果:与空白组比较,LPS(1 mg·L-1)能明显降低BV2细胞活性,显著升高IL-1β,TNF-α及NLRP3 mRNA表达水平(P <0. 01),且可提升NLRP3蛋白表达水平以及Caspase-1剪切体和前体蛋白的比值(Caspase-1 p20/Caspase-1)。与LPS组比较,脑心通醇提物(2,10,50 mg·L-1)干预后,逆转了LPS导致的细胞活性降低(P <0. 01),50 mg·L-1脑心通醇提物可显著降低IL-1β,TNF-α及NLRP3 mRNA表达水平(P <0. 05,P <0. 01),显著降低LPS诱导的NLRP3的高表达以及Caspase-1 p20/Caspase-1(P <0. 01)。结论:脑心通能明显抑制LPS诱导的小胶质细胞焦亡,其作用机制与NLRP3/Caspase-1通路密切相关。

• 单位
  中国中医科学院中药研究所; 贵州中医药大学