超高效液相色谱法检测6种探针底物代谢产物并评价人细胞色素P450同工酶活性

作者：陆苑; 谢玉敏; 潘洁; 黄勇; 王永林

来源：贵阳医学院学报, 2015, 40(06): 560-565.

DOI：10.19367/j.cnki.1000-2707.2015.06.004

• 色谱法,液相
• 细胞色素P450酶系统
• 肝微粒体
• Cocktail探针药物法

目的:建立同时测定非那西丁(CYP1A2)、氯唑沙宗(CYP2E1)、甲苯磺丁脲(CYP2C9)、奥美拉唑(CYP2C19)、睾酮和咪达唑仑(CYP3A4)6种探针底物代谢产物的Cocktail体外方法,评价药物对人肝微粒体CYP450同工酶活性的影响。方法:人肝微粒体与6种探针底物在还原系统NADPH的作用下,37℃共同孵育;以蛋白沉淀法处理样品,采用超高效液相色谱系统(UPLC-MS/MS),建立Cocktail混合探针,对药物的6种代谢物进行定量分析,并分析药物对人肝微粒体CYP450同工酶活性的影响。结果:6种探针底物物代谢产物乙酰氨基酚(0.268.35μmol/L)、6-羟基氯唑沙宗(3.0296.63μmol/L)、5-羟基奥美拉唑(0.103.09μmol/L)、羟基甲苯磺丁脲(0.154.88μmol/L)、6β-羟基睾酮(3.67117.37μmol/L)和α-羟基咪达唑仑(1.6452.37μmol/L)线性关系良好,各成分相关系数(R2)>0.996,准确度为95.96%103.10%,日内和日间精密度RSD(%)<15%,提取回收率、基质效应RSD(%)<11%,稳定性好。结论:UPLC-MS/MS准确、灵敏度高,可作为研究受试药物对CYP450酶影响及相关研究的分析测定方法。

• 单位
  贵州医科大学